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ForteBio代理
產(chǎn)品時間:2021-10-28
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八位字節(jié) K2 系統(tǒng)

Octet® K2 2 通道系統(tǒng)讓您訪問精致的生物分子相互作用數(shù)據(jù)。為初創(chuàng)學術和生物技術實驗室定價,小批量用戶在選擇無標記分析系統(tǒng)時不再受成本和性能之間的權衡的束縛。Octet K2 系統(tǒng)表征蛋白質-蛋白質和蛋白質-小分子結合相互作用,用于早期研究和發(fā)現(xiàn)。該多用途系統(tǒng)還通過測量活性蛋白濃度提供定量信息——即使是在細胞培養(yǎng)上清液和裂解液等復雜混合物中。

 

 

小分子分析的靈敏度

Octet K2 系統(tǒng)能夠測量小至 150 Da 的小分子與其較大的結合伙伴之間的相互作用,以確定準確的動力學速率。

 

 

靈活的第二通道用作參考或更多樣品

*的 2 通道設計具有用于同時參考或增加容量的專用光譜儀。

 

 

蛋白質和抗體表征的簡單設置

模板驅動的界面允許新用戶快速開始蛋白質和抗體表征。

 

2 通道入門級 Octet 系統(tǒng):Octet K2

 

技術

 

基于光纖生物傳感器的生物層干涉測量 (BLI)

 

樣品量

 

180–220 µL/

無損檢測,易于回收

 

數(shù)據(jù)呈現(xiàn)

 

顯示動力學軌跡或濃度結合率的傳感圖

表位合并和交叉阻斷矩陣和軌跡疊加

制表的動力學或濃度數(shù)據(jù)

 

自動化

 

最多可同時進行 2 次檢測

 

軌道流量

 

靜態(tài)或 400–1500 rpm

 

分析溫度

 

環(huán)境溫度 + 4°C 40°C,以 1°C 為增量

 

結合率常數(shù) (k a )

 

10 1 10 7 M -1 S -1

 

解離速率常數(shù) (k d )

 

10 -6 10 -1-1

 

親和常數(shù) (K D )

 

1 毫米 – 10 下午

 

基線噪聲 (RMS)

 

<3.5 下午

 

基線漂移

 

< 0.1 納米/小時

 

定量范圍

 

0.05 μg/mL 2000 μg/mL(人 IgG 和蛋白 A 生物傳感器)

依賴于蛋白質和測定

 

定量精度

 

簡歷 <10%

 

重量

 

58 磅(26.3 公斤)

 

尺寸(高 x x 深)

 

18.6 英寸(高)x 17 英寸(深)x 20.8 英寸(

寬)47 厘米(高)x 43 厘米(深)x 53 厘米(寬)

樣品類型

 

蛋白質、抗體、肽、含血清的培養(yǎng)基(高達 25%)、含 DMSO 的緩沖液、病毒樣顆粒、未處理的細胞培養(yǎng)上清液和粗細胞裂解物

 

樣板

 

標準、96 孔、黑色、平底微孔板

 

分子量檢測

 

>150

Fortebio 公司的超級鏈霉親和素(ssa)生物傳感器主要是用于小分子應用的生物傳感器。當用作參考表面時,ssabiosensors 通常被 biocytin 阻塞(有關運行小分子分子量分析的更多細節(jié),請參見技術說明16,小分子結合動力學)。然而,這個參考表面的光學特性不同于目標表面的光學特性,可能是由于光深度的增加伴隨著目標生物傳感器蛋白質層的增加。對于高靈敏度的應用,這種差異可能在原始數(shù)據(jù)中引入較小的人為因素,導致在評估化合物或負性控制時的變異性略高。當使用這里描述的引用方法時,與標準的引用方法相比,模型系統(tǒng)緩沖控制產(chǎn)生的信號標準差要低1-3 pm。這個結果非常重要,因為下午1-3點的標準差轉化為下午3-9點的檢測限的差異(其中 llod = 3 x 標準差 + 平均背景信號) ,這對于從那些接近背景水平的信號中區(qū)分真實信號非常重要。

選擇一個蛋白質作為參考生物傳感器,最佳的參考蛋白質是一個與目標蛋白質相同,但不結合感興趣的分子。有些群體很幸運,有不活躍的蛋白質突變體,這些是創(chuàng)建參考生物傳感器的理想?yún)⒖嫉鞍?。如果有這種蛋白質,它應該與目標蛋白質進行類似的生物素化(見技術說明6,將蛋白質進行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上,以及技術說明12,將極少量的蛋白質進行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上)。為達到最佳效果,生物素化參考蛋白應以類似于目標蛋白的密度裝載到 ssa 生物傳感器上。生物素化參考蛋白可以按照這里描述的方法進行檢測。更常見的是,不活躍的蛋白質版本不可用,必須使用替代物。鏈霉親和素的阻斷形式是一個有用的替代品ーー在作為參考的 ssa 生物傳感器上增加一層阻斷鏈霉親和素,使目標和參考生物傳感器的光學特性更加相似。為了達到最佳效果,參考蛋白的負載信號應該與目標蛋白的負載信號相似。下面的協(xié)議創(chuàng)建生物素化,阻斷鏈霉親和素(sav-b4) ,并描述了如何使用它在參考生物傳感器。

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